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hybridisierungspuffer die niedermolekulares dextransulfat verwenden und methoden zu deren verwendung
tampons d'hybridation au moyen de dextran-sulfate a faible poids moleculaire et leurs methodes d'utilisation

hybridisierungspuffer nach anspruch 9, wobei der polyvinylalkohol und/oder die polystyrolsulfonsäure in form eines salzes vorliegt.
tampon d'hybridation selon la revendication 9, dans lequel le poly(alcool vinylique) et/ou le poly(acide styrènesulfonique) est présent sous la forme d'un sel.

hybridisierungspuffer nach einem der ansprüche 9 bis 13, wobei polyethylenglycol in einer konzentration von 1 bis 25 % vorliegt.
tampon d'hybridation selon l'une quelconque des revendications 9 à 13, dans lequel du polyéthylèneglycol est présent à une concentration de 1 à 25 %.

hybridisierungspuffer nach einem der ansprüche 9 bis 12, wobei dextransulfat in einer konzentration von 0,1 bis 10 % vorliegt.
tampon d'hybridation selon l'une quelconque des revendications 9 à 12, dans lequel du sulfate de dextran est présent à une concentration de 0,1 à 10 %.

hybridisierungspuffer nach anspruch 9 oder anspruch 10, wobei der polyvinylalkohol mit einem molekulargewicht von 1000 bis 20 000 in einer konzentration von 1 bis 10 % vorliegt.
tampon d'hybridation selon la revendication 9 ou 10, dans lequel un poly(alcool vinylique) ayant une masse moléculaire de 1 000 à 20 000 est présent à une concentration de 1 à 10 %.

hybridisierungspuffer nach anspruch 9 oder anspruch 10, wobei die polystyrolsulfonsäure mit einem molekulargewicht von 60 000 bis 80 000 in einer konzentration von 1 bis 10 % vorliegt.
tampon d'hybridation selon la revendication 9 ou 10, dans lequel un poly(acide styrènesulfonique) ayant une masse moléculaire de 60 000 à 80 000 est présent à une concentration de 1 à 10 %.

hybridisierungspuffer nach einem der ansprüche 9 bis 14, wobei zur verminderung unspezifischer bindung ein kationisches detergens in einer konzentration von 0,02 bis 2,0 % vorliegt.
tampon d'hybridation selon l'une quelconque des revendications 9 à 14, dans lequel un détergent cationique est présent, à une concentration de 0,02 à 2,0 %, pour réduire la liaison non spécifique.

4 (1986), s. 274-325, beschrieben ist, durchführt. verfahren zum nachweis einer nucleinsäuresequenz, die in einem der ansprüche 13 bis 19 definiert ist, dadurch gekennzeichnet, daß man mit einer der sonden nach anspruch 22 eine stufe der vorhybridisierung der gewünschten rna, die zuvor zugänglich gemacht worden ist, unter den folgenden bedingungen durchführt: eine behandlung von 16 stunden bei 56°c in einem medium zur vorhybridisierung, das den folgenden puffer enthält: 3 m tetramethylammoniumchlorid, 50 millimolar tris-hcl, ph-wert: 8,0, 2 millimolar edta, 100 µg/ml beschallte denaturierte kalbsthymus-dna, 5x denhardt-lösung; eine hybridisierung unter den folgenden bedingungen durchführt: 1-stündige behandlung bei der gleichen temperatur mit etwa 100 pg einer der sonden oder eines gemisches der sonden, die in anspruch 22 definiert sind, anschließend unter den folgenden bedingungen wäscht: 5 minuten in 5x ssc, 0,1 % sds bei umgebungstemperatur; 5 minuten in 5x ssc, 0,1 % sds bei 59°c; 2 durchgänge im vorstehend angegebenen hybridisierungspuffer ohne denhardt-lösung und ohne kalbsthymus-dna für 1 stunde bei 59°c. verfahren zur herstellung eines polypeptids, das in einem der ansprüche 1 bis 12 definiert ist, wobei das verfahren folgenden stufen umfaßt: kultur eines kompetenten zellulären wirts, der vorher mit einer nucleinsäure transformiert wurde, die eine nucleotidsequenz enthält, die für die in einem der ansprüche 1 bis 21 definierten polypeptide codiert und in der diese nucleotidsequenz sich unter der steuerung von regulationselementen, insbesondere von einem promotor, der von den polymerasen des kompetenten zellulären wirts erkannt wird, sowie von initiations-und terminationselementen der transkription, befindet, und gewinnung des polypeptidprodukts ausgehend von expressionsprodukten des zellulären wirts.
procédé de détection d'une séquence d'acides nucléiques définie dans les revendications 13 à 19, caractérisé en ce que: on effectue, avec l'une des sondes de la revendications 22, une étape de préhybridation de l'arn cible, préalablement rendu accessible, dans les conditions suivantes: traitement à 16 heures à 56°c dans le milieu de pré-hybridation contenant le tampon suivant : 3m chlorure de tétraméthylammonium, 50mm tris- tris-hc1, ph 8.0, 2mm edta, 100µg/ml dna soniqué, dénaturé de thymus de veau, 5x denhardt, on effectue une hybridation dans les conditions suivantes: traitement pendant 1 heure à la même température avec environ 100 pg d'une des sondes ou d'un mélange des sondes définies à la revendication 22, on effectue ensuite un lavage dans les conditions suivantes : 5 minutes dans 2x ssc, 0,1% sds à températurure ambiante, 5 minutes dans 5x ssc, 0,1% sds à 59°c, deux passages dans le tampon d'hybridation ci-dessus, sans denhardt ni adn de veau pendant 1 h, à 59°c. procédé de préparation d'un polypeptide défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 12, comprenant les étapes suivantes: la culture d'un hôte cellulaire compétent, auparavant transformé avec un acide nucléique contenant une séquence de nucléotides codant pour les polypeptides définis dans l'une des revendications 1 à 21 et dans laquelle cette séquence de nucléotides se trouve placée sous le contrôle d'éléments de régulation, dont notamment un promoteur reconnu par les polymérases de cet hôte cellulaire compétent, les éléments d'initiation et de terminaison de la traduction, et la récupération du polypeptide produit à partir des produits d'expression de cet hôte cellulaire.