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d) a positive ion fab spectrum, obtained on a kratos ms-50 double focusing mass spectrometer, using 8 kv accelerating voltage and a saddle field atom gun with xe gas (2 x 10⁻⁵ torr pressure indicated on the source ion gauge) at 6 kv voltage and 1 ma current in a glycerol matrix acidified with 0.1 n ch₃cooh in positive ionization mode, showing three protonated molecular ions [m +h]⁺ at m/z 1082, 1068, and 1054 e) retention-times (r t ) of 10.3, 10.56, 11.12 min. when analyzed by reverse phase hplc under the following conditions: column: bakerbond r octyl (c8) (reverse phase silanized silica gel; 5 micrometers) 4.6 x 250 mm precolumn: brownlee labs rp 8 (octasilane silica gel; 5 micrometers) eluent a: ch₃cn - 6.6mm ammonium citrate 20:80(v/v) eluent b: ch₃cn - tetrahydrofuran - isopropyl alcohol - 6.6 mm ammonium citrate 35:25:10:30(v/v/v/v) elution mode: linear gradient from 40% to 60% of eluent b in eluent a in 20 min. flow rate: 1.8 ml/min u.v. detector: 254 nm. which comprises cultivating streptomyces hygroscopicus under submerged aerobic conditions in the presence of assimilable sources of carbon, nitrogen, and inorganic salts, recovering and isolating the produced antibiotic ge1655 complex therefrom, purifying it and optionally separating it into factors a, b, and c having the following characteristics: antibiotic ge1655 factor a a) ultraviolet absorption spectrum which exhibits the following absorption maxima: lambda max (nm) phosphate buffer ph 7.4 240 268 methanol 240 260 b) ¹h-nmr spectrum which exhibits the following groups of signals (in ppm) at 500 mhz recorded in dmso-d₆ (hexadeuterodimethylsulfoxide) using tms as the internal standard (0.00 ppm): 7.45 (br s); 7.17 (m); 6.30-6.15 (m); 5.95-5.80 (m); 5.39 (m); 5.08 (m); 4.72 (m); 4.02 (m); 3.83 (m) ; 3.67 (m); 3.3 (h₂o); 3.09 (m); 2.73 (s); 2.50 (dmso-d₆); 2.38 (m); 2.00-1.90 (m); 1.73 (m); 1.59 (s); 1.02 (d); 0.95 (d); 0.90-0.75 (d) c) positive ion fab spectrum , obtained on a kratos ms-50 double focusing mass spectrometer, using 8 kv accelerating voltage and a saddle field atom gun with xe gas (2 x 10 ⁻⁵ torr pressure indicated on the source ion gauge) at 6 kv voltage and 1 ma current in a glycerol matrix acidified with 0.1n ch₃cooh in positive ionization mode, showing the [m+h]⁺ peak at m/z 1082 d) retention-time (r t ) of 11.12 min. when analyzed by reverse phase hplc under the following conditions: column: bakerbond r octyl (c8) (reverse phase silanized silica gel; 5 micrometers) 4.6 x 250 mm precolumn: brownlee labs rp 8 (octasilane silica gel; 5 micrometers) eluent a: ch₃cn - 6.6mm ammonium citrate 20:80(v/v) eluent b: ch₃cn - tetrahydrofuran - isopropyl alcohol - 6.6 mm ammonium citrate 35:25:10:30 (v/v/v/v) elution mode: linear gradient from 40% to 60% of eluent b in eluent a in 20 min. flow rate: 1.8 ml/min u.v. detector: 254 nm.

Français

rp 8 (gel de silice octasilané; 5 µm) eluant a: ch₃cn/citrate d'ammonium 6,6 mm 20:80 (v/v) eluant b: ch₃cn/tétrahydrofuranne/alcool isopropylique/citrate d'ammonium 6,6 mm 35:25:10:30 (v/v/v/v). mode d'élution: gradient linéaire de 40 à 60 % d'éluant b dans l'éluant a, en 20 minutes. débit: 1,8 ml/min détecteur uv: 254 nm, comprenant la culture de streptomyces hygroscopicus dans des conditions aérobies submergées, en présence de sources assimilables de carbone, d'azote et de sels minéraux, la récupération et l'isolement à partir de cette culture du complexe antibiotique ge1655 produit, sa purification et éventuellement sa séparation en facteurs a, b et c ayant les caractéristiques suivantes : facteur a de l'antibiotique ge1655 a) spectre d'absorption dans l'ultraviolet comportant les maximums d'absorption suivants: λ max (nm) tampon phosphate ph 7,4 240 268 méthanol 240 260 b) spectre de rmn-¹h comportant les groupes de signaux (en ppm) suivants, à 500 mhz, enregistrés dans du dmso-d₆ (hexadeutérodiméthylsulfoxyde) à l'aide de tms en tant qu'étalon interne (0,00 ppm): 7,45 (s la.); 7,17 (m); 6,30-6,15 (m); 5,95-5,80 (m); 5,39 (m); 5,08 (m); 4,72 (m); 4,02 (m); 3,83 (m); 3,67 (m); 3,3 (h₂o); 3,09 (m); 2,73 (s); 2,50 (dmso-d₆); 2,38 (m); 2,00-1,90 (m); 1,73 (m); 1,59 (s); 1,02 (d); 0,95 (d); 0,90-0,75 (d). c) spectre de masse-fab à ions positifs, obtenu sur un spectromètre de masse à double focalisation kratos ms-50, en utilisant une tension d'accélération de 8 kv et un canon atomique à champ en étrier avec du xénon (sous une pression de 2×10⁻⁵ torr indiquée sur le manomètre ionique de la source) à une tension de 6 kv et avec un courant de 1 ma, dans une matrice de glycérol acidifiée avec ch₃cooh 0,1 n, en mode d'ionisation positive, présentant le pic [m + h]⁺ à m/z 1082.

Dernière mise à jour : 2014-12-04
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