Je was op zoek naar: préimmobilisée (Frans - Engels)

une méthode pour isoler ou déterminer la présence, ou la quantité, d'un acide nucléique cible, dans un échantillon, la méthode étant du type qui implique l'utilisation (i) d'une sonde de capture immobilisable comprenant une queue et une région de liaison à une cible, qui est une séquence d'oligonucléotides renfermant des bases mélangées, complémentaire à la séquence de l'acide nucléique cible et (ii) d'un substrat qui est fixé à un support solide, la queue et le substrat formant ensemble une paire d'affinité, caractérisée en ce que ladite méthode comprend les étapes de: (a) fournir un substrat de polynucléotides comprenant un homopolymère (dt) ou (da) ou le polymère d'une séquence de nucléotides répétitive simple de (dt) et de (da), par exemple (dt) n , (da) n , (dadt) n ou (dadadtdt) n , dans lesquelles n est suffisamment grand pour se rapporter à un polymère de environ 50 à environ 3000 nucléotides, fixé à un support polymère solide; (b) mettre en contact, dans des conditions propices à l'hybridation, le substrat de polynucléotides avec une sonde de capture consistant essentiellement en une région de liaison à une cible et en une queue qui est un oligonucléotide ou un polynucléotide, dont la séquence est complémentaire au substrat de polynucléotides, de sorte que une première région hybridée est formée entre la queue et le substrat de polynucléotides, pour obtenir une sonde de capture préimmobilisée; et (c) mettre en contact l'échantillon avec la sonde de capture préimmobilisée, dans des conditions propices à l'hybridation, de sorte que si l'acide nucléique cible est présent dans l'échantillon, une seconde région hybridée est formée entre la séquence de nucléotides cible et la région de liaison à la cible de la sonde de capture, pour obtenir un acide nucléique cible immobilisé.
a method for isolating or determining the presence or amount of a target nucleic acid in a sample, the method being of the type which involves the use of (i) an immobilizable capture probe comprising a tail and a target binding region which is a mixed base oligonucleotide sequence complementary to the target nucleic acid sequence and (ii) a substratum which is affixed to a solid support, the tail and the substratum together forming an affinity pair, characterized in that said method comprises the steps of: (a) providing a polynucleotide substratum comprising a (dt) or (da) homopolymer or the polymer of a simple repeating nucleotide sequence of (dt) and (da), for example (dt) n , (da) n , (dadt) n or (dadadtdt) n , where n is sufficiently large to refer to a polymer of from about 50 to about 3000 nucleotides affixed to a solid polymeric support; (b) contacting, under hybridizing conditions, the polynucleotide substratum with a capture probe consisting essentially of a target binding region and a tail which is an oligonucleotide or a polynucleotide, the sequence of which is complementary to the polynucleotide substratum, such that a first hybridized region is formed between the tail and the polynucleotide substratum to obtain a preimmobilized capture probe; and (c) contacting the sample with the preimmobilized capture probe under hybridizing conditions, such that if the target nucleic acid is present in the sample, a second hybridized region is formed between the target nucleotide sequence and the target binding region of the capture probe to obtain an immobilized target nucleic acid.