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verfahren zur bestimmung der spiegel von vorlÄufermolekÜlen des menschlichen natriuretischen peptids typ b
procedes de determination de niveaux de precurseurs de peptide natriuretique humain de type b (bnp)

patentansprüche für folgenden vertragsstaat : es verfahren zur herstellung eines analogen von menschlichem insulin mit der folgenden formel: wobei x 1 , x 2 , x 3 , y 1 und y 2 jede beliebige, natürlich vorkommende aminosäure sind; x 4 lys oder arg ist; x 5 ausgewählt ist aus der gruppe, bestehend aus jeder beliebigen, natürlich vorkommenden aminosäure mit ausnahme von pro; und x 6 jede beliebige natürlich vorkommende aminosäure ist, die die c-terminale hydroxygruppe trägt, oder -oh oder x 5 und x 6 zusammen die c-terminale hydroxygruppe bilden, wobei eine dna-sequenz, die ein vorläufermolekül des insulin--analogen kodiert, in ein geeignetes hefe-expressions-vehikel insertiert ist, das, wenn es in hefe überführt wird, in der lage ist, den vorläufer des insulin-analogen zu exprimieren und zu sekretieren, in dem [lysb 28 ], [arg b28 ], [lys b29 ] oder [arg b29 ] mit gly a1 verbunden ist durch eine peptidbindung oder ein peptid der formel iii -r(n)-r(1)- wobei r eine peptidkette mit n aminosäureresten, n eine ganze zahl von 0 bis 33 und r(1) lys oder arg ist, der transformierte hefestamm in einem geeigneten nährmedium gezüchtet wird, und der vorläufer aus dem kulturmedium wiedergewonnen und mit einer aminoverbindung der formel iv q-qr" umgesetzt wird, wobei q ein einzelner aminosäurerest ist und r" eine carboxy-schutzgruppe wie methyl oder tert-butyl ist, unter verwendung von trypsin oder einem trypsin-artigen enzym als katalysator in einem gemisch von wasser und organischen lösungsmitteln, woraufhin die carboxy-schutzgruppe entfernt wird und das insulin-analoge aus dem reaktionsgemisch isoliert wird, oder ein vorläufer eines insulin-analogen, in dem die c-terminale aminosäure nicht lys oder arg ist, wobei der vorläufer eine brücke aus einem einzelnen paar von basischen aminosäuren, ausgewählt aus der gruppe, bestehend aus lys und arg, zwischen dem c-terminalen und gly a1 besitzt, isoliert werden kann und dann durch enzymatische behandlung unter verwendung von trypsin oder carboxypeptidase b in das insulin-analoge umgewandelt werden kann. verfahren zur herstellung eines analogen von menschlichem insulin mit der folgenden formel: wobei x 1 , x 2 , x 3 , y 1 und y 2 jede beliebige, natürlich vorkommende aminosäure sind; x 4 lys oder arg ist; x 5 ausgewählt ist aus der gruppe, bestehend aus jeder beliebigen, natürlich vorkommenden aminosäure mit ausnahme von pro; und x 6 jede beliebige natürlich vorkommende aminosäure ist, die die c-terminale hydroxygruppe trägt, oder -oh oder x 5 und x 6 zusammen die c-terminale hydroxygruppe bilden, wobei menschliches des(b23-b30)-insulin hergestellt wird durch behandeln eines insulins mit trypsin unter abspaltung der (b23-b30)- aminosäuren, das gewünschte peptid von sechs bis acht aminosäuren synthetisiert wird, das resultierende peptid an menschliches des(b23-b30)-insulin gekoppelt wird und das resultierende insulin-analoge aus dem reaktionsgemisch isoliert wird.
revendications pour l'etat contractant suivant : es processus pour préparer un analogue d'insuline humaine ayant la formule suivante : où x 1 , x 2 , x 3 , y 1 et y 2 sont tout résidu d'acide aminé survenant naturellement, x 4 est lys ou arg, x 5 est sélectionné parmi le groupe constitué de tout résidu d'acide aminé survenant naturellement à l'exception de pro, et x 6 est tout résidu d'acide aminé survenant naturellement portant le groupe hydroxyle, ou -oh, de l'extrémité c-terminale, ou x 5 et x 6 forment ensemble le groupe hydroxyle de l'extrémité c-terminale, une séquence d'adn codant pour un précurseur de l'analogue d'insuline en question étant inséré dans un véhicule d'expression de levure adapté qui, lorsqu'il est transféré dans la levure, est capable d'exprimer et de sécréter le précurseur de l'analogue d'insuline dans lequel [lys b28 ], [arg b28 ], [lys b29 ] ou [arg b29 ] est relié à gly a1 par une liaison peptidique ou un peptide ayant la formule iii -r n -r 1 - où r est une chaíne peptidique ayant n résidus d'acide aminé, n est un entier compris entre 0 et 33 et r 1 est lys ou arg, la souche de levure transformée est cultivée dans un milieu nutritif adapté, et le précurseur est récupéré à partir du bouillon de culture et mis à réagir avec un composé aminé ayant la formule iv q-or" où q est un résidu d'acide aminé unique et r" est un groupe de protection carboxyle tel qu'un méthyle ou un tert-butyle, en utilisant de la trypsine ou une enzyme du type trypsine en tant que catalyseur dans un mélange d'eau et de solvants organiques, après ceci le groupe de protection carboxyle est éliminé et l'analogue d'insuline est isolé du mélange de réaction, ou un précurseur d'analogue d'insuline dans lequel l'acide aminé de l'extrémité c-terminale est différent de lys ou de arg, ledit précurseur ayant un pont constitué d'une paire unique d'acides aminés basiques sélectionnés parmi le groupe constitué de lys et arg entre l'extrémité c-terminale et gly a1 peut être isolé et ensuite converti dans l'analogue d'insuline par traitement enzymatique en utilisant de la trypsine et une carboxypeptidase b. processus pour préparer un analogue d'insuline humaine ayant la formule suivante : où x 1 , x 2 , x 3 , y 1 et y 2 sont tout résidu d'acide aminé survenant naturellement, x 4 est lys ou arg, x 5 est sélectionné parmi le groupe constitué de tout résidu d'acide aminé survenant naturellement à l'exception de pro, et x 6 est tout résidu d'acide aminé survenant naturellement portant le groupe hydroxyle, ou -oh, de l'extrémité c-terminale, ou x 5 et x 6 forment ensemble le groupe hydroxyle de l'extrémité c-terminale, dans lequel des(b23-b30)-insuline humaine est préparé en traitant une insuline par la trypsine pour cliver les acides aminés (b23 à b30), le peptide voulu de six à huit acides aminés est synthétisé, le peptide résultant est relié à des(b23-b30)-insuline humaine, et l'analogue d'insuline résultant est isolé du mélange de réaction.