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knöllchenbakterien
rhizobium

zusammensetzung fÜr die inokulation mit knÖllchenbakterien
composition pour inoculant de rhizobium

verfahren zur herstellung eines lipo-oligosaccharids nach einem der ansprüche 3 bis 5 durch reinigung, dadurch gekennzeichnet , daß man in einer ersten stufe ein rekombinantes plasmid, resultierend aus der klonierung in einem plasmid, das sich in einem knöllchenbakterium oder in einem anderen geeigneten bakterium replizieren kann, (1) entweder eines fragments, das gemeinsame und spezifische nod-gene sowie regulatorgene eines gegebenen knöllchenbakteriums enthält, oder (2) von regulatorgenen der expression der nod-gene herstellt, die knöllchenbakterien oder ein geeignetes anderes bakterium anschließend durch einschleusen des genannten rekombinanten plasmids modifiziert, um einen mutierten nod-faktoren stark überproduzierenden stamm zu erhalten, und daß man den genannten mutierten stamm in einem geeigneten kulturmedium kultiviert und in einer zweiten stufe den Überstand der kultur gewinnt, den man durch extraktion mit einem geeigneten niederen alkohol oder durch geeignete fest-flüssig-extraktion, gefolgt von einer umkehrphasen-hplc-chromatographie des extraktionsrückstands, einer gelpermeations-chromatographie, einer ionenaustausch-chromatographie und einer analytischen unkehrphasen-hplc-chromatographie reinigt.
procédé de production d'un lipo-oligosaccharide selon l'une quelconque des revendications 3 à 5, par purification, caractérisé en ce qu'au cours d'une première étape on produit un plasmide recombinant résultant du clonage dans un plasmide capable de se répliquer dans une bactérie rhizobiacée ou toute autre bactérie appropriée, (1) soit d'un fragment qui contient des gènes nod communs et spécifiques ainsi que les gènes régulateurs d'une bactérie rhizobiacée donnée, soit (2) des gènes régulateurs de l'expression des gènes nod, les bactéries rhizobiacées ou toute autre bactérie appropriée sont ensuite modifiées par introduction dudit plasmide recombinant, pour obtenir une souche mutante très surproductrice de facteurs nod, et on cultive ladite souche mutante dans un milieu de culture approprié ; - au cours d'une deuxième étape on recueille le surnageant de culture, que l'on purifie par extraction par un alcool inférieur approprié, ou par extraction solide-liquide appropriée, suivie d'une chromatographie hplc en phase inverse du résidu d'extraction, d'une chromatographie par perméation de gel, d'une chromatographie par échange d'ions et d'une chromatographie hplc analytique en phase inverse.