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the mixture obtained is dounce homogenized.
le mélange obtenu est homogénéisé au dounce.

the mixture obtained is homogenized in a dounce.
le mélange obtenu est homogénéisé au dounce.

cells in suspension were obtained from this spleen by homogenization with a dounce.
des cellules en suspension ont été obtenues à partir de cette rate par homogénéisation avec un dounce.

the resuspended cells were left on ice for 30 minutes and then homogenized with 50 strokes of a dounce homogenizer, and cooled in ice.
les cellules resuspendues ont été laissées sur de la glace pendant 30 minutes et puis homogénéisées par 50 coups d'homogénisateur dounce, refroidi dans la glace.

the new residue was recovered in the same buffer and finally rehomogenized on a dounce at a tissue concentration of 10 mg/ml.
le nouveau culot a été repris dans le même tampon et finalement réhomogénéisé au dounce à une concentration tissulaire de 10 mg/ml.

the supernatant is centrifuged for 20 min at 10 000 g and the p 2 thus obtained is recovered in 4 ml of sucrose 0.32 m and homogenized on a dounce.
le surnageant est centrifugé 20 mn à 10 000 g et le p 2 ainsi obtenu repris dans 4 ml de sucrose 0,32 m et homogénéisé au dounce.

the cells were then lysed by 30-40 piston strokes in a dounce glass homogenizer, and the resulting homogenate was then centrifuged at 110,000 g for 30 minutes.
les cellules ont ensuite été lysées par 30-40 coups de piston dans un homogénéisateur en verre dounce, et l'homogénat résultant a été ensuite centrifugé à 1 10 000 g pendant 30 minutes.

bead-associated proteins are then isolated and collected for biochemical analysis using a combination of cytoskeletal extraction, sonication, dounce homogenization, and magnetic pelleting of the beads
les protéines associées aux billes sont ensuite isolées par extraction du cytosquelette, par sonication, homogénéisation et enrobage magnétique combinés des billes, et recueillies pour analyse chimique

a method using microbeads coated with specific extracellular matrix ligands, for example, fibronectin or rgd-containing peptide, or any molecule that ligates integrins and thereby mediates attachment and spreading, even through receptors other than integrins, can be applied to the surface of microbeads to induce integrin clustering and isolate functional focal adhesion complexes (facs) from eukaryotic cells such as mammalian, insect, or plant cells. in the preferred embodiment, magnetic microbeads are utilized. bead-associated proteins are then isolated and collected for biochemical analysis using a combination of cytoskeletal extraction, sonication, dounce homogenization, and magnetic pelleting of the beads. the facs are demonstrated to be functionally active and to contain a number of enzymatically and otherwise biologically active proteins. this method for fac isolation facilitates analysis of molecular interactions and chemical and mechanical signaling mechanims within functionally intact facs, independent of global changes in cells shape or cytoskeletal organization. it also serves as a means to isolate and identify proteins not previously known or known to be present in facs, which can be used to form diagnostics such as peptides, nucleic acid probes or antibodies. the isolated facs can also be used to screen for molecules which impact on the mechanical and chemical signalling systems within the facs.
l'invention concerne un procédé d'utilisation de microbilles enrobées de ligands matriciels extracellulaires spécifiques tels que, par exemple, des fibronectines ou un peptide contenant rgd, ou toute molécule liant les intégrines et participant ainsi à la fixation et à la propagation, même par l'intermédiaire d'autres récepteurs que l'intégrine, que l'on peut appliquer sur la surface de microbilles de manière à induire le groupement des intégrines et à isoler les complexes d'adhésion focale fonctionnels (fac) de cellules eucaryotes telles que des cellules de mammifères, d'insectes ou de plantes. dans le mode préféré de réalisation, on utilise des microbilles magnétiques. les protéines associées aux billes sont ensuite isolées par extraction du cytosquelette, par sonication, homogénéisation et enrobage magnétique combinés des billes, et recueillies pour analyse chimique. les fac s'avèrent être fonctionnellement actifs et contenir un certain nombre de protéines enzymatiquement et biologiquement actifs. ce procédé d'isolation des fac facilite l'analyse des interactions moléculaires et des mécanismes de signalisation chimique et mécanique dans les fac fonctionnellement intacts, indépendamment des changements globaux de forme cellulaire ou d'organisation du cytosquelette. il sert également de moyen d'isolation et d'identification de protéines non connues auparavant ou sensées être présentes dans les fac, et pouvant être utilisées pour former des agents diagnostiques tels que des peptides, des sondes d'acide nucléique ou des anticorps. les fac isolés peuvent également être utilisés pour détecter des molécules ayant une incidence sur les systèmes mécaniques et chimiques dans les fac.