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amplifikationsmultimeres

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verfahren nach anspruch 13, dadurch gekennzeichnet , daß das multifunktionelle nukleotid die formel besitzt, in der r 2 für oder steht. verfahren zur herstellung eines großen kammartig verzweigten polynukleotids nach anspruch 1, welches als ein amplifikationsmultimeres bei einem nukleinsäure-hybridisierungsassay nützlich ist, umfassend: (a) synthetisieren eines einzelsträngigen polynukleotid-rückgrats, umfassend: (i) mindestens 15 multifunktionelle nukleotide, von denen jedes eine geschützte funktionelle gruppe besitzt, welche als eine stelle zur seitenketten-nukleotidverlängerung dient, und (ii) eine erste einzelsträngige oligonukleotideinheit, welche eine erste einzelsträngige polynukleotidsequenz von interesse spezifisch binden kann; (b) entschützen der funktionellen gruppen; (c) verlängern jeder dieser stellen um mindestens etwa 5 nukleotide, um die ligationsstellensegmente bereitzustellen, und (d) ligieren von zweiten einzelsträngigen oligonukleotideinheiten an die ligationsstellensegmente, wobei die zweiten einzelsträngigen oligonukleotideinheiten wiederholungen einer sequenz umfassen, welche ein zweites einzelsträngiges oligonukleotid von interesse binden kann.

Französisch

le procédé de la revendication 13 dans lequel le nucléotide multifonctionnel présente la formule dans laquelle r 2 représente ou un procédé destiné à la réalisation d'un grand polynucléotide ramifié de type peigne selon la revendication 1, utilisable comme multimère d'amplification dans un test d'hybridation d'acides nucléiques comprenant : (a) la synthèse d'un squelette polynucléotidique simple brin comprenant : (i) au moins 15 nucléotides multifonctionnels, chacun de ceux-ci ayant un groupe fonctionnel protégé qui sert de site d'extension d'une chaíne latérale nucléotidique et (ii) une première unité oligonucléotidique simple brin qui est capable de se lier spécifiquement à une première séquence polynucléotidique simple brin d'intérêt ; (b) la déprotection desdits groupes fonctionnels ; (c) l'extension de chacun desdits sites d'au moins environ cinq nucléotides pour fournir des segments constituant des sites de ligature ; et (d) la ligature de secondes unités oligonucléotidiques simple brin aux segments constituant des sites de ligature, lesdites secondes unités oligonucléotidiques simple brin comprenant des répétitions d'une séquence qui est capable de se lier à un second oligonucléotide simple brin d'intérêt.

Letzte Aktualisierung: 2014-12-03
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