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h) preparing a solution of an ampholyte mixture of said dried product and identifying structural components of said product by capillary isoelectrophoresis

Francese

h) préparer une solution d'un mélange d'ampholyte de ce produit séché et identifier les constituants structurels de ce produit par électrophorèse capillaire

Ultimo aggiornamento 2011-07-27
Frequenza di utilizzo: 1
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Inglese

a method of obtaining a novel polypeptide from a crude extraction product of polysaccharide peptide coriolus versicolor comprising: a) boiling a water soluble powder of polysaccharide peptide coriolus versicolor; b) centrifuging a boiled product from step a); c) filtering a centrifuged product from step b); d) purifying a solution from step c) by gel filtration chromatography; e) subjecting the purified material from step d) to hplc using a reversed-phase at ambient temperature, wherein a solvent composition is at an acidic ph and further includes kc1 solvent, and wherein an elution system consists of a linear gradient of about 80 % methanol applied at a rate of from between 0-40 minutes to obtain chromatographic peaks; f) analyzing said chromatographic peaks by monitoring for absorbance at about 230 nm, 1.0 aufs for protein analysis and about 620 nm, 0.02 aufs for polysaccharide analysis and collecting fractions of each peak in a microfractionator; g) filter-sterilizing each eluent of each chromatographic fraction peak, and drying product therefrom under reduced pressure; h) preparing a solution of an ampholyte mixture of said dried product and identifying structural components of said product by capillary isoelectrophoresis; and i) using gel filtration to obtain polypeptides products of from about 10k and to 50k.

Francese

un procédé permettant d'obtenir un nouveau polypeptide d'un produit d'extraction brut de peptides polysaccharide coriolus versicolor consiste à: a) faire bouillir une poudre soluble dans l'eau du peptide polysaccharide coriolus versicolor; b) centrifuger le produit cuit de l'étape a); c) filtrer le produit centrifugé de l'étape b); d) purifier la solution de l'étape c); e) soumettre le matériau purifié de l'étape d) à l'analyse hlhr (chromatographie liquide à haut rendement) en utilisant une phase inverse à température ambiante. une composition de solvants est à un niveau de ph acide et comprend également le solvant de kcl, et un système d'élution se compose d'un gradient linéaire d'environ 80 % de méthanol appliqué à une vitesse comprise entre 0 et 40 minutes afin d'obtenir des crêtes chromatographiques; f) analyser ces crêtes chromatographiques en contrôlant l'absorbance à environ 230 nm, 1,0 aufs pour l'analyse des protéines et à environ 620 nm, 0,02 aufs pour l'analyse des polysaccharides et rassembler les fractions de chaque crête dans une colonne de microfractionnement; g) stériliser par filtration chaque éluent de chaque crête chromatographique de fraction, et sécher le produit obtenu à pression réduite; h) préparer une solution d'un mélange d'ampholyte de ce produit séché et identifier les constituants structurels de ce produit par électrophorèse capillaire; et i) utiliser la filtration sur gel pour obtenir des produits de polypeptides d'environ 10k à 50k.

Ultimo aggiornamento 2011-07-27
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