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100 µl de serum additionné de 200 µl d'eau et de 1 ml de solvant pour extraction sont placés dans un tube d'extraction et agités vigoureusement pendant 30 minutes à 20-25°c. un volume 100 µl de la phase organique est transféré dans un tube à essai en vere siliconé et évaporé sous pression réduite à 40°c. dans le tube contenant le résidu de l'extraction de la 25-hydroxy-vitamine d₃, ajouter successivement 50 µl de la solution de traceur (± 25000 cpm) et 0.5 ml ligand.
100 μl of serum treated with 200 μl of water and with 1 ml of extraction solvent are placed in an extraction tube and agitated vigorously for 30 minutes at 20 a 100 μl volume of the organic phase is transferred to a siliconed glass test tube and evaporated under reduced pressure at 40 to the tube containing the extraction residue of 25-hydroxyvitamin d.sub.3, 50 μl of the tracer solution (≃25,000 cpm) and 0.5 ml of ligand are added successively.