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loopvloeistof, ph 6,0
elutionsmittel, ph 6,0

loopvloeistof met detectiereagens
lösung mit reagens

laat nooit loopvloeistof (5.2) in de kolommen staan.
das elutionsmittel darf niemals in den säulen bleiben (5.2).

filtreer de loopvloeistof vóór gebruik over een membraanfilter met een poriegrootte van 0,45 μm.
vor der verwendung wird die elutionslösung durch einen membranfilter mit 0,45 µm porendurchmesser filtriert.

homogeniseer de geëlueerde loopvloeistof en giet ongeveer de helft van het volume in een andere kegelvormige kolf.
das eluierte lösungsmittel homogenisieren und ungefähr die hälfte der menge in einen anderen erlenmeyerkolben gießen.

plaats de plaat opnieuw in de tank en laat de loopvloeistof opstijgen tot aan de bovenkant van dc plaat.
dann wird die platte erneut in die trennkammer gestellt und man läßt das fließmittel bis zum oberen rand der platte aufsteigen.

de samenstelling van de loopvloeistof bij het begin van de analyse wordt volgens 8.4.2 bepaald.
die zusammensetzung des elutionsmittels beim beginn der analyse wurde in absatz 8.4.2 beschrieben.

opmerking 4: bij elke bepaling dient de loopvloeistof te worden ververst om volkomen reproduceerbare elutiecondities te verwezenlijken.
anmerkung 4: das gemisch ist jedes mal frisch anzusetzen, damit die wiederholbarkeit gewährleistet ist.

verwijder de plaat uit de tank en laat de loopvloeistof verdampen in een hete luchtstroom of door de plaat gedurende korte tijd in een zuurkast te zetten.
dann die platte aus der entwicklerkammer nehmen und das lösungsmittel in einem warmen luftstrom abdampfen oder die platte eine geraume zeit unter dem abzug liegen lassen.

vervolgens wordt een nieuwe lineaire gradiënt gestart die het percentage b in de loopvloeistof in 5 minuten op 90 % brengt.
danach beginnt ein gradient, bei dem sich die zusammensetzung des elutionsmittels in 5 minuten auf 90 % b einstellt.

nb: om de levensduur van de kolom te verlengen is het cruciaal dat het kooldioxidegehalte van de loopvloeistof zo laag mogelijk is en dat heropname wordt voorkomen.
anmerkung: um die lebensdauer der säule zu verlängern, muss sichergestellt werden, dass der kohlendioxidanteil des elutionsmittels möglichst gering ist und dass eine erneute aufnahme ausgeschlossen werden kann.

nb: de samenstelling van de loopvloeistof kan worden aangepast om aan het certificaat van de standaaards of de aanbevelingen van de fabrikant van het pakkingsmateriaal van de kolom te voldoen.
anmerkung: die zusammensetzung des elutionsmittels kann so geändert werden, dass die im zertifikat der standardlösungen vorgegebenen anforderungen oder die herstelleranweisungen bzw. die anforderungen an das packmaterial der säule erfüllt werden.

nb 2: houd de loopvloeistof (5.2) gedurende de hele chromatografische analyse op 85 °c om de vloeistof ontgast te houden en bacteriegroei te voorkomen.
anmerkung 2: das elutionsmittel (5.2) sollte während der gesamten chromatografischen analyse eine temperatur von 85 °c haben, um das elutionsmittel gasfrei zu halten und unerwünschtes bakterienwachstum zu verhindern.

injecteer een nauwkeurig afgemeten hoeveelheid van 100 μl supernatans of filtraat (8.3.3) in het hplc-apparaat bij een debiet van 1,0 ml loopvloeistof (5.2) per minuut.
genau 100 µl des Überstandes bzw. filtrates (8.3.3) werden in die hplc-apparatur injiziert, in die das elutionsmittel (5.2) mit 1,0 ml/minute geleitet wird.