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Diese Ergebnisse bestätigen nochmals die Eignung des neuen Suchvektors zur Isolierung besonders starker Streptomycetenpromotoren.

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These results confirm once again the suitability of the new screening vector for isolating particularly strong Streptomyces promoters.

Son Güncelleme: 2014-12-03
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Beispiel 4: Subklonierung der Promotoren zum Nachweis ihrer Aktivität außerhalb des Suchvektors Um Artefakte, wie z.B. Sequenzkonstellationen aus der mehrfachen Klonierungsstelle von pGL703 und dem inserierten DNA-Fragment, die zu einer Promotoraktivität führen könnten, auszuschließen, wurden p14 und pS1 in den Vektor pIJ487 (erhältlich bei der John Innes Foundation, Norwich, England) subkloniert und in S. lividans auf die Expression des promotorlosen Neomycingens selektioniert.

İngilizce

EXAMPLE 4 Subcloning of the promoters to demonstrate their activity outside the screening vector In order to rule out artifacts such as, for example, sequence constellations from the multiple cloning site of pGL703 and the inserted DNA fragment, which might lead to promoter activity, p14 (SEQ ID NO: 1) and pS1 (SEQ ID NO: 2) were subcloned into the vector pIJ487 (obtainable from the John Innes Foundation, Norwich, England) and selected in S. lividans for the expression of the promoterless neomycin gene.

Son Güncelleme: 2014-12-03
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Aus diesem Grund ist das Indikatorgen besonders gut für die Identifizierung stärkerer Promotoren geeignet. Ein weiterer Vorteil des Suchvektors ist die Möglichkeit, Promotor-tragende DNA-Fragmente auf ihre Aktivität hin direkt, d.h. ohne Umklonierungen, in E. coli zu testen.

İngilizce

This is why the indicator gene is particularly well suited for the identification of strong promoters. Another advantage of the screening vector is the possibility of testing promoter-harboring DNA fragments for their activity directly, i.e. without reclonings, in E. coli.

Son Güncelleme: 2014-12-03
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Hier kommt eine weitere Eignung des Suchvektors zur Geltung, da er neben einer singulären BamHI- eine singuläre ClaI-Schnittstelle vor dem Indikatorgen aufweist, welche die Subklonierung der Phagen-DNA mittels des alternativen Vielschneiderenzyms TaqI erlaubt.

İngilizce

In this respect a further suitability of the screening vector becomes evident because it has in front of the indicator gene not only a unique BamHI but also a unique ClaI cleavage site which allows subcloning of the phage DNA by means of the alternative multicutter enzyme TaqI.

Son Güncelleme: 2014-12-03
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Die Erfindung betrifft einen Promotor-Suchvektor, Verfahren zur Identifizierung und Isolierung von Streptomyceten-Promotoren mit Hilfe dieses Suchvektors sowie die isolierten Promotoren selbst, vorzugsweise die nachstehend beschriebenen Promotoren pS1 und p14 des S. ghanaensis Phagen I19.

İngilizce

BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The invention relates to a promoter screening vector, to methods for the identification and isolation of Streptomyces promoters using the screening vector, and to the isolated promoters themselves, preferably the ps1 (SEQ ID No: 2) and p14 (SEQ ID NO: 1) promoters of the S. ghanaensis phage I19 which are described hereinafter. 2.

Son Güncelleme: 2014-12-03
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Die Erfindung betrifft einen Promotor-Suchvektor, Verfahren zur Identifizierung und Isolierung von Streptomyceten-Promotoren mit Hilfe dieses Suchvektors sowie die isolierten Promotoren selbst, vorzugsweise die nachstehend beschriebenen Promotoren pS1 und p14 des S. ghanaensis Phagen I19.

İngilizce

The invention relates to a promoter search vector, a process for the identification and isolation of Streptomycetes promoters with the aid of this search vector and the isolated promoters themselves, preferably the promoters pS1 and p14 of the S. ghanaensis phage l19 described below.

Son Güncelleme: 2014-11-28
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