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intermediärfilamentproteine
protéines de filaments intermédiaires

fibroblasten-intermediärfilamentproteine
protéines de filaments intermédiaires

verfahren nach anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die proteolytische solubilisierung der zu identifizierenden intermediärfilamentproteine bis maximal zur einfachen teilung der alpha-helikalen mittelstücke in jeweils zwei mittelstückfragmente erfolgt.
procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solubilisation protéolytique des protéines de filaments intermédiaires à identifier a lieu au maximum jusqu'à la séparation simple des pièces médianes d'hélice alpha dans chaque groupe de fragments de pièces médianes .

verfahren zur identifizierung des differenzierungszustandes und des ursprungs einer zellgewebsprobe oder von zellgewebstrümmern in körperflüssigkeit durch solubilisierung der in dieser probe beziehungsweise körperflüssigkeit vorhandenen unlöslichen intermediärfilamentproteine in form von löslichen fragmenten, vorzugsweise der alpha-helikalen mittelstücke, und identifizierung dieser so erhaltenen oder bereits ohne zusätzliche aufbereitung in der probe enthaltenen fragmente nach ihrem ursprungsgewebetyp durch immunreaktion mit spezifischen antikörpern, wobei als antikörper solche eingesetzt werden, die zur identifizierung - vorzugsweise zur eindeutigen identifizierung - von intermediärfilamentproteinen nach ihrem ursprungsgewebetyp geeignet sind und außerdem nach mehreren verschiedenen bekannten testverfahren mit dem alpha-helikalen mittelstück - beziehungsweise einem epitop-tragenden fragment davon - eines durch rekonstitution aus gereinigten monomeren des jeweils betreffenden intermediärfilamentproteins gewonnenen standards immunologisch reagieren, dadurch gekennzeichnet, daß ein standard aus den zu identifizierenden mittelstücken beziehungsweise epitop-tragenden fragmenten hergestellt wird, indem aus dem entsprechenden gewebe oder einer geeigneten zellkultur-linie durch extraktion und reinigung die einzelnen cytoskelett-polypeptide isoliert werden, daß dann aus diesen polypeptiden beziehungsweise im falle der cytokeratine aus einem äquimolaren gemisch von polypeptiden der relativ basischen (typ ii) und der sauren (typ i) unterfamilien als nächste untereinheiten dimere, sodann tetramere und schließlich protofilamente gebildet werden, und daß dann durch kontrollierte verdauung mit protease die alpha-helikalen mittelstücke dieser intermediärfilamente als dimere oder tetramere komplexe freigesetzt, isoliert und gereinigt und als standard eingesetzt werden.
procédé d'identification de l'état de différenciation et de l'origine d'un échantillon de tissu de cellules ou de débris de tissus de cellules dans du fluide corporel,par solubilisation des protéines de filaments intermédiaires insolubles,présentes dans cet échantillon ou dans ce fluide corporel,sous forme de fragments solubles , avantageusement les pièces médianes d'hélice alpha, et identification de ces fragments ainsi obtenus,ou déjà contenus sans préparation supplémentaire dans l'échantillon,d'après leur type de tissu d'origine par réaction immunologique avec des anticorps spécifiques, où l'on utilise comme anticorps ceux qui conviennent bien pour l'identification - avantageusement pour une identification univoque- de protéines de filaments intermédiaires selon leur type de tissu d'origine,et qui,d'autre part,réagissent immunologiquement selon plusieurs procédés différents connus d'essai avec la pièce médiane d'hélice alpha - ou avec un fragment de cette pièce porteur d'épitope, d'un modèle étalon obtenu par reconstitution à partir de monomères purifiés de la protéine de filament intermédiaire en cause à chaque fois, procédé caractérisé en ce que l'on prépare un modèle étalon à partir des pièces intermédiaires à identifier ou des fragments porteurs d'épitopes,en isolant les divers polypeptides de cytosquelette,par extraction et purification à partir des tissus correspondants ou d'une lignée convenable de culture de cellules, l'on forme ensuite,à partir de ces polypeptides,ou dans le cas des cytokératines,à partir d'un mélange équimolaire depolypeptides des sous-familles relatives basiques (type ii) ou acides ( type i),comme sous-unités les plus proches,des dimères, puis des tétramères et enfin des protofilaments,et l'on met ensuite en liberté,par digestion réglée effectuée avec des protéases, les pièces intermédiaires d'hélice alpha de ces filaments intermédiaires,sous forme de complexes dimères ou tétramères,on les isole et les purifie et on les utilise comme modèle étalon .