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fitc
fluorescein 5 isothiocyanate
最后更新: 2014-12-09
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esta fuente de iluminación de fluorescencia compacta y de precio atractivo es ideal, por ejemplo, para aplicaciones fitc como las que se usan en inmunohistoquímica.
this compact, attractively priced fluorescence illumination source is ideal for fitc applications as used in immunohistochemistry, for example.
podrá visualizar fluorocromos como dapi, fitc o cy5.5, ya que el sensor es extremadamente sensible, incluso en el rango próximo a infrarrojo.
you can monitor fluorochromes like dapi, fitc up to cy5.5, because the sensor is highly sensitive even in the near-infrared range
detección de citoimmunofluorescencia del aparato de golgi y mhc i las células se lavaron dos veces con pbs y se fijaron con 3% pfa en pbs durante 20 minutos a temperatura ambiente. después de la fijacion con pfa, se realizo una segunda fijacion por inmersión de los portaobjetos en metanol 7208c durante 4 minutos, a continuación, las células se lavaron tres veces en pbs. para la detección de ag, las células fueron incubadas con el anticuerpo monoclonal 4a3 por 30 min a temperatura ambiente, lavadas y se incubaron con alexa- fluortm 488 cabra anti-ratón igg (h l) conjugado (molecular probes, europe bv) por 30 min a temperatura ambiente. para la detección de mhc i endógeno de superficie, las células fueron incubadas con el anticuerpo monoclonal il-a19 o acm il-a88 durante 1 hora a temperatura ambiente y se lavó tres veces más como anteriormente. las células fueron incubadas con anticuerpos anti-igg de ratón- fitc (sigma) a 48c durante 1 h en la oscuridad. después de tres lavados finales con pbs, los cubreobjetos fueron montados en pbs y analizados bajo el microscopio de fluorescencia. detección de mhc de clase i por facs las células fueron cultivadas en un cm2 175 º pido que aproximadamente el 80% confluencia. después de la eliminación del medio, las células fueron lavadas una vez con pbs, y luego separado de la flask con tripsina / edta y se sedimentaron a 200 g por 5 min a temperatura ambiente. el pellet de células se resuspendió en dmem, 10% fcs, durante 1 hora a 378c para permitir que los antígenos de superficie que se re-expresen. las células fueron lavadas y resuspendidas en pbs-
cytoimmunofluorescent detection of golgi apparatus and mhc i the cells were washed twice with pbs and ®xed with fresh 3% pfa in pbs for 20 min at room temperature. after the pfa ®xation, a second ®xation was performed by dipping the chamber slides in 7208c methanol for 4 min; then the cells were washed three times in pbs. for ga detection, the cells were incubated with mab 4a3 for 30 min at room temperature, washed as above and incubated with alexa- fluortm 488 goat anti-mouse igg(h l) conjugate (molecular probes, europe bv) for 30 min at room temperature. for the detection of endogenous surface mhc i, the cells were incubated with mab il-a19 or mab il-a88 for 1 h at room temperature and washed three times as above. the cells were then incubated with anti-mouse igg- fitc (sigma) at 48c for 1 h in the dark. following three ®nal washes with pbs, the slides were mounted in pbs and analysed under the ¯uorescence microscope. detection of mhc class i by facs cells were grown in a 175 cm2 ¯ask to approximately 80% con¯uence. after removal of the medium, the cells were washed once with pbs, then detached from the ¯ask with trypsin/edta and pelleted at 200 g for 5 min at room temperature. the cell pellet was resuspended in dmem, 10% fcs, for 1 h at 378c to allow surface antigens to be re- expressed. the cells were washed and re-suspended in pbs-