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emerainville, france - 13/02/2015
emerainville, france - 13/02/2015

these data confirm that: the lvps indeed contain lipids, the lipid concentration of the lvps is different from those of the normal lipoproteins; this therefore excludes any contamination, and the lvps contain apo b. 1.3 presence of apolipoproteins b and e the presence of apo b and of apo e was demonstrated by preventing the entry of the lvps into plc cells after blocking the sites of binding to the apo b and apo e receptors of said cells as follows: 5×10 5 plc/pfr/5 human hepatoma cell line cells (atcc crl 8024) (alexander cells) (human hepatoma) were cultured in 96-well plates (maxisorb, nunc) for 24 h with a dmem culture medium (gibco, brl) supplemented with 10% of fetal calf serum (biowhittaker, emerainville, france), 2 mm of hepes (gibco/brl), 1% of nonessential amino acids (gibco/brl) and 50 iu of penicillin/streptamycin (gibco/brl)/ml at 37° c. firstly, the apo b receptor-binding sites were blocked with monoclonal antibodies directed against the apo b receptor-binding site (4g3 and 5 e 11; ottawa heart institute research corporation, ottawa, ontario canada) and, secondly, the apo e receptor-binding sites were blocked with monoclonal antibodies 1d7 (ottawa heart institute research corporation).
ces données confirment que : - les lvp contiennent bien des lipides, - la concentration en lipides des lvp est différentes de celles des lipoprotéines normales ; cela exclut donc toute contamination, et - les lvp contiennent de l'apo b. 1.3 présence d'apoliprotéines b et e on a mis en évidence la présence d'apo b et d'apo e en empêchant l'entrée des lvp dans des cellules plc après blocage des sites de liaison aux récepteurs de apob et apoe desdites cellules comme suit : on a cultivé 5 x 10 5 cellules de lignées cellulaires d'hépatome humaines plc/pfr/5 (atcc crl 8024) (alexander cells) (hepatoma humain) dans des plaques de 96 puits (maxisorb, nunc ?) pendant 24 h avec un milieu de culture dmem (gibco,brl) complémenté avec 10%» de sérum de veau fœtal (biowhittaker, emerainville, france), 2mm d'hepes (gibco/brl), 1% d'acides aminés non essentiels (gibco/brl) et 50 ui de pénicilline/streptamycine (gibco/brl)/ml à 37°c. on a bloqué d'une part les sites de liaison au récepteur de l'apo b avec des anticorps monoclonaux dirigés contre le site de liaison au récepteur de apo b (4g3 et 5 b 11 ; ottawa heart institute research corporation, ottawa, ontario canada) et d'autres part les sites de liaison aux récepteurs de l'apo e avec des anticorps monoclonaux 1d7 (ottawa heart institute research corporation).